Optimización de la expresión de la metaloproteinasa recombinante BaP1 en Pichia pastoris
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| Autor: | |
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| Formato: | tesis |
| Fecha de Publicación: | 2021 |
| Descripción: | La proteína BaP1 es una metaloproteinasa de la clase P1 del veneno de la serpiente Bothrops asper, la cual contribuye al daño tisular local al inducir inflamación, alteraciones de la matriz extracelular, mionecrosis, dermonecrosis y hemorragia local. La tecnología de ADN recombinante supone una herramienta para realizar modificaciones en su secuencia codificante de proteínas y así estudiar las relaciones entre su estructura y función. El sistema de expresión en la levadura Pichia pastoris es una alternativa rápida, poco costosa, de fácil cultivo, con disponibilidad comercial y capaz de altos niveles de proteínas expresadas con apropiadas modificaciones postraduccionales. En el presente trabajo se optimizó la cepa de Pichia pastoris, la temperatura y el pH de expresión; hallando un mayor rendimiento en la cepa KM71H que presenta un metabolismo lento del metanol (MutS) y utilizando un pH de 6. Variaciones en la temperatura permiten diferentes patrones de corte, encontrándose un predominio de la proenzima a 20°C y un predominio de la enzima madura a 30°C. |
| País: | Kérwá |
| Institución: | Universidad de Costa Rica |
| Repositorio: | Kérwá |
| Lenguaje: | Español |
| OAI Identifier: | oai:kerwa.ucr.ac.cr:10669/102245 |
| Acceso en línea: | https://hdl.handle.net/10669/102245 |
| Palabra clave: | metaloproteniasa BaP1 Pichia pastoris expresión recombinante ADN recombinante Bothrops asper secuencia codificante de proteínas sistema de expresión modificaciones postraduccionales pH cepa KM71H GS115 X33 SVMPs Metaloproteinasas de venenos de serpientes fenotipo Mut toxinología enzimología tratamiento antiofídico biología molecular metaloproteinasa metaloproteinasas de venenos de serpientes |