Evaluación del papel de los neutrófilos (PMNs) en la patología producida por Clostridioides (Clostridioides) difficile utilizando un bio-modelo murino

 

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Detalles Bibliográficos
Autor: Montoya Torres, Brayan Diddey
Formato: tesis de maestría
Fecha de Publicación:2022
Descripción:Clostridioides difficile es una bacteria enteropatógena responsable de brotes graves de infecciones intrahospitalarias y casos de diarreas esporádicas a nivel mundial. Causa un cuadro conocido como diarrea asociada a C. difficile (DACD), la cual puede evolucionar a colitis pseudomembranosa, megacolon tóxico e inclusive hasta la muerte. La patogénesis de la infección por C. difficile primordialmente depende de sus principales factores de virulencia, la toxina A (TcdA) y la toxina B (TcdB) capaces de ocasionar una potente alteración del tejido intestinal, disrupción epitelial, retención de líquidos, inducción de una intensa respuesta inflamatoria y exacerbada infiltración de PMNs. Esta última característica clínica es determinante en la severidad de la enfermedad, sobre todo, cuando hay estímulos inflamatorios continuos provocando una inflamación de tipo crónico desencadenando una desregulación neutrofílica. A pesar de que se sabe que los neutrófilos (PMNs) juegan un papel importante en la patología de esta infección, no existen estudios in vivo que utilicen estrategias de agotamiento de PMNs expuestos a las toxinas de C. difficile en el lumen intestinal evaluando directamente el papel de estas células inmunes en la patología desencadena por las toxinas de C. difficile. Por esa razón, esta investigación evaluó el efecto en la respuesta inflamatoria, actividad mieloperoxidasa (MPO) y efectos histopatológicos inducidos por las toxinas de C. difficile en presencia o ausencia de PMNs. Para esto se utilizó un biomodelo reduccionista de asa intestinal ligada combinado con un modelo de ratones neutropénicos y no neutropénicos a los cuales se les inocularon las toxinas purificadas combinadas TcdAVPI10463/003+TcdBNAP1/027, y por separado TcdAVPI10463/003, TcdBNAP1/027 y TcdBNAP1/019 de C. difficile. Adicionalmente, se evaluó la capacidad de los PMNs humanos y murinos de fagocitar y asociarse a los clostridios diseñando un modelo in vitro. La capacidad fagocítica de los PMNs de ratón fue más eficiente que la de los PMN de humanos. En los ratones, la disminución de la cantidad de plaquetas en sangre favoreció aún más el proceso de asociación (fagocitosis) de los PMNs frente a los clostridios. En el modelo in vivo, se observó que la depleción parcial de los PMNs, tanto periférica como tisularmente, generó una disminución en el nivel de patogénesis producida por las toxinas de C. difficile, ocasionando una reducción significativa de la respuesta proinflamatoria, inflamatoria, indicadores de daño histopatológico y actividad MPO. La reducción de estos efectos fue observada mayormente con la enterotoxina TcdA. En contraste, también se logró identificar que la exotoxina TcdBvNAP1 posee una actividad histopatológica casi similar a la TcdBNAP1. Estos resultados sugieren que, durante el proceso de inflamación los PMNs promueven parte del proceso patológico, debido a la desregulación que se observa durante la patogénesis producida por las toxinas TcdA y TcdB en la infección causada por C. difficile. Este estudio permitió mejorar el conocimiento sobre el papel de los PMNs frente a las toxinas TcdA y TcdB en un ambiente fisio-patológico real con la interacción de las múltiples señales tisulares generadas por estas toxinas.
País:Repositorio UNA
Institución:Universidad Nacional de Costa Rica
Repositorio:Repositorio UNA
Lenguaje:Español
OAI Identifier:oai:null:11056/27175
Acceso en línea:http://hdl.handle.net/11056/27175
Palabra clave:BACTERIAS
DIARREA
ENFERMEDADES INFECCIOSAS
INFECTIOUS DISEASES
TOXINAS
ORGANISMOS PATÓGENOS
PATHOGENIC ORGANISMS
TOXINS
DIARRHEA